本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標板微孔上預包被喹諾酮類抗原,樣本中殘留的喹諾酮類藥物和微孔上預包被的抗原競爭喹諾酮類抗體(抗試劑),加入酶標二抗(酶標物)后,經TMB底物顯色,樣本的吸光值與其殘留物喹諾酮類藥物的含量呈負相關,與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數,即可得出樣本中殘留物喹諾酮類藥物的含量。
適用范圍
可定性、定量檢測蜂蜜、牛奶、奶粉等樣品中喹諾酮類藥物的殘留量。
1、將所需試劑從冷藏環境中取出,置于室溫(20~25°C)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均需輕輕搖勻。?
2、取出需要數量的微孔板,將不用的微孔板放進原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8°C。切勿冷凍。?
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。?
4、編號:將樣品和標準品對應微孔按序編號,每個樣品和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣品孔所在的位置。?
5、加標準品/樣品:加標準品/樣本50μL/孔到對應的微孔中,再加入喹諾酮類酶標物50μL/孔,再加入喹諾酮類的抗試劑50μL /孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環境中反應30min。?
6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,用洗滌液250μL/孔,充分洗滌4~5次,每次間隔10~20s,用吸水紙拍干(拍干后若有氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。?
7、顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環境中反應15min。?
8、測定:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設定酶標儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,請在5min內讀完數據),測定每孔OD值。
?結果判定
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