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概要?

乳鐵蛋白(lactoferrin，LF)是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結合糖蛋白，中性粒細胞顆粒中具有殺菌活性的單體糖蛋白。 乳鐵蛋白不僅參與鐵的轉運，而且具有廣譜抗菌、抗氧化、抗 癌、調節免疫系統等強大生物功能，被認為是一種新型抗菌、 抗癌藥物和極具開發潛力的食品和飼料添加劑。?

本試劑盒是應用ELISA技術研發的新一代牛乳鐵蛋白檢測產品，操作時間需 45min，能減少操作誤差和工作強度。?

實驗原理?

牛乳鐵蛋白ELISA檢測試劑盒采用雙抗體夾心ELISA 方法，在酶標微孔上預包被牛乳鐵蛋白抗體，預包被的牛乳鐵蛋白抗體與酶標抗體 （酶標物）同時與樣本中的牛乳鐵蛋白結合，形成抗體—牛乳鐵蛋白—酶標抗體復合物，經TMB底物顯色，樣本吸光值與 牛乳鐵蛋白的含量呈正相關，與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數，即可得出樣本中牛乳鐵蛋白的含量。?

適用范圍?

牛乳鐵蛋白ELISA檢測試劑盒可定性、定量檢測奶粉樣本中牛乳鐵蛋白的含量。

貯藏條件及有效期?

貯藏條件：保存試劑盒于 2～8℃。?

有效期：該產品有效期為 12 個月。

1、將所需試劑從冷藏環境中取出，置于室溫（20～25℃）平 衡 1 小時或 37℃溫箱平衡 30min 以上，注意每種液體試劑 使用前均須完全溶解搖勻。

2、取出需要數量的微孔板，將不用的微孔板放進原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于 2～8℃。切勿 冷凍。?

3、洗滌工作液在使用前也需回溫。

4、編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標 準品做 2 孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。

5、加標準品/樣本：加牛乳鐵蛋白酶標物 50μL/孔到對應的微 孔中，再加入標準品或樣本 50μL/孔。輕輕振蕩混勻，用 蓋板膜蓋板后置 37℃避光環境中反應 15min。?

6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用洗滌液 250μL/ 孔，充分洗滌 4~5 次，每次間隔 10s，用吸水紙拍干（拍 干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。

7、顯色：加入底物液 A 液 50μL/孔，再加入底物液 B 液 50μL/ 孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置 37℃避光環境中反 應 10min。?

8、測定：加入終止液 50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀 于 450nm 處（建議用雙波長 450/630nm 檢測，請在 5min 內讀完數據），測定每孔 OD 值。